2018.09.21.,péntek
mod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_countermod_vvisit_counter
Ma:39
Tegnap:118
Ezen a héten:547
Ebben a hónapban:2424
Összesen:672590

Csenki Zsolt: Petefészekvizsgálatok oocyta transzplantáció után zebradánió (Danio rerio) halfajon

Csenki Zsolt (1), Andreas Zaucker (2), Yavor Hadzhiev (2), Hegyi Árpád (1), Ficsura Anita (1), Urbányi Béla (1), Müller Ferenc (2) és Váradi László (1)
1.) Szent István Egyetem, Mezőgazdaság- és Környezettudományi Kar, Halgazdálkodási Tanszék, Gödöllő
2.) Institute of Toxicology and Genetics Forschungszentrum, Karlsruhe, Germany

Kivonat

Az emlősöknél széleskörűen elterjedt és hatékony petesejt manipulációs módszerek (transzgén injektálás, mélyhűtéses tárolás) a halikrákon az ikra magas sziktartalma és vastag ikrahéj nem, vagy nehezen alkalmazhatók. Új lehetőségeket nyújthatnak a korai fejlődési állapotú oocytákon végezhető módszerek. Sikeres oocyta transzplantáció alkalmazásával, kiküszöbölhetők az ikrák felépítéséből adódó hiányosságok, könnyen vizsgálhatóak lehetnek az oocytában, illetve az ikrában lezajló folyamatok, az anyai hatások.
A vizsgálat célkitűzése volt, hogy fiatal fejlődési állapotú (szikfelhalmozás előtti, de még jól látható sejtmaggal rendelkező) oocyták "nevelő"-anyába juttatása után, hogyan fejlődnek a donor oocyták a recipiens petefészekben, illetve nyerhetők-e donor genetikai állományú termékenyítésre alkalmas ikrák.
Vizsgálataink során zebradánió (Danio rerio) fajon végeztünk intraspecifikus átültetéseket. Egy alkalommal átlagosan 30 db szikfelhalmozódás előtti oocytát jutattunk be recipiens petefészekbe. Az átültetések nyomonkövetésére markerként transzgenikus (β-aktin YFP jelölésű) zebradánió oocytákat használtunk. A manipulált petefészkeket, különböző időpontokban fluoreszcens mikroszkóp alatt vizsgáltuk. Vizuálisan értékeltük, hogy mennyi donor oocyta épült be a recipiens petefészekbe, illetve ezek közül mennyi fejlődött tovább. In situ hibridizációs technika segítségével bizonyítottuk, hogy a beültetett oocytákban működik a transzgén, és a fluoreszcens mikroszkóp alatt észlelt izzás valóban a transzgén működésének eredménye, nem autofluoreszencia.
A recipiens petefészkek vizsgálata során azt tapasztaltuk, hogy csak az első két napon csökkent jelentősen a bejuttatott oocyták aránya. Amelyek a 4.-5. nap még túléltek a recipiens petefészekben, azok már beépültek és néhány közülük már megkezdte a szikbeépítést is.
A még be nem fejezett vizsgálataink alapján elmondható, hogy a transzplantáció sikerrel végrehajtható, az oocyták egy része beépül és fejlődik a „nevelő” anyában.